核糖核酸酶A（Ribonuclease A，常用縮寫RNase A），一種含4個二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為13.7 kDa（氨基酸序列）。作為一種核糖核酸內切酶（endoribonuclease），特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）殘基。具體來說，切割識別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類核苷酸3’-核糖上磷酸基團形成的磷酸二酯鍵，從而使得2’, 3’-環(huán)磷酸水解為對應的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG經RNase A切割產生pG-pG-pCp 和A-PG）。RNase A切割單鏈RNA活性最高，推薦工作濃度為1-100 μg/mL，兼容于各種反應體系。低鹽濃度（0-100 mM NaCl），可用來切割單鏈RNA，雙鏈RNA，以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。然而，高鹽濃度（≥ 0.3 M），RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
產品性質
| CAS號（CAS NO.） | 9001-99-4 |
| 外觀（Appearance） | 白色凍干粉末 |
| 激活劑（Activator） | 鈉鹽、鉀鹽等 |
| 抑制劑（Inhibitor） | 核酸酶抑制劑 |
| 失活方法（Inactivation） | 加熱不會失活，建議用離心柱或者酚氯仿抽提來充分去除 |
| 來源（Source） | 牛胰腺 |
| 溶解性（Solubility） | 溶于水（10 mg/mL） |
| 酶活力（Activity） | ≥ 60 Kunitz units/mg |
配置存儲方法
| 此為RNase A儲存液配制的常用方法之一，也可以根據(jù)實驗室傳統(tǒng)的方法，或者參考文獻資料使用其他方法制備儲存液（如直接溶于10 mM Tris-HCl, pH 7.5或者Tris-NaCl溶液）。在中性條件下煮沸RNase A溶液，會有RNase沉淀形成；在更低的pH下將其煮沸，如有沉淀可以觀察到，可能由于蛋白雜質存在造成。煮沸之后若發(fā)現(xiàn)沉淀，可通過高速離心（13,000 rpm）去除雜質，然后分裝凍存。 |
| 1）利用10 mM的醋酸鈉（pH 5.2）制備10 mg/mL 的RNase A 儲存液； |
| 2）100℃加熱15 min； |
| 3）冷卻到室溫，加入1/10體積的1 M Tris-HCl（pH 7.4），調其pH至7.4（如：5 mL 10 mg/mL的RNase 儲存液加入500 μL 1 M Tris-HCl, pH 7.4）； |
| 4）分裝于-20℃凍存，可穩(wěn)定保存長達2年。 |
訂購信息
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產品名稱 |
貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
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RNA酶 |
G-05-0100 |
100mg | 詢價 |
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RNA酶 |
G-05-1000 |
1g | 詢價 |
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